液相色譜儀操作及原理(高效液相色譜儀的泵壓力上不去是什么原因)

可能的原因：

1.purge閥沒有擰緊；

2.泵體充滿氣體，可以擰緊出口閥開大流速直至有液體就出再擰緊即可；

3.某個管路接口沒有擰緊或者某條管路斷了導致漏液。

開電源，開機，設置參數方法，準備工作完成，開始平衡，分析，輸出結果，打印。

液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。 基本用途: 液相色譜儀對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現分離。 使用范圍: 應用于生物醫學、環境化學、石油化工等部門。 系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內。 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統。

高效液相色譜儀的圖譜算不上指紋圖譜，只是組份分離后的光譜吸收圖，色譜分析方法主要是歸一法，內標法，外標外等廣州大學來定性定量的，比如在相同條件（流動相，色譜柱條件不變）下，分析已知含量的標準樣品，得到相應的保留時間和面積，然后將相應的未知含量組份進樣分析，得到圖譜后，對比保留時間和面積，通過比較保留時間識別組份名稱（定性），按比例計算出組份含量（定量）；

1．將已經過濾并脫氣的流動相注入儲液罐；

2. 用流動相沖洗金屬過濾器，然后將過濾器浸入儲液罐的流動相中；

3. 將儲液罐放置在一定的高度，以避免由于搬運和其他操作人員的移動而造成不必要的跌落。

4. 然后按以下順序依次啟動高效液相色譜儀：泵→檢測器→高效液相色譜軟件→按預先計劃的方法設置軟件參數，如分析時間、檢測波長、流速等。

5. 啟動泵，運行5分鐘，主要是為了排除系統中的氣泡，結束后關閉所有排氣閥；

6. 然后按照預先計劃的速度，以固定的速率，如1mL/min左右，運行流動相，走基線，直到基線平穩，就可以在計算機軟件上進行監視；

7. 基線平穩后，在軟件中設置樣品的運行參數，如流速和分析時間等。分析時間會因樣品、流速、柱長等因素變化。

8. 參數設置完畢后，將固定體積的樣品溶液注入進樣閥，然后在軟件中啟動注入命令，進樣器中的樣品溶液就隨流動相進入色譜柱；

9. 通過軟件監視各項讀數，當檢測器檢測到樣品所有峰值，停止運行并設置新的進樣。在下一個樣品分析前，建議留出5-10分鐘，待流動相通過色譜柱，以便清洗之前樣品的殘留物；確認基線穩定后，進行下一次注射。

10. 分析結束后，先關閉檢測器，然后關閉泵，最后關閉軟件。